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Human/人

人乙肝核心抗體(HBcAb)elisa試劑盒

人乙肝核心抗體(HBcAb)elisa試劑盒

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貨號: QC14166
樣本: 血清、血漿、細胞上清液、組織勻漿等
標記物: 詳見說明書
應用: 科研檢測
檢測方法: 酶聯免疫法,ELISA法,雙抗夾心法
檢測限: 見說明書
供應商: 上海欽誠生物科技
數量: 100
規格: 96T/48T
注意事項:
1.酶標板袋拆封后,盡快將不用的板孔放回,并放入干燥劑,保持酶標板干燥。
2.用戶在初次使用試劑盒時,應將試劑盒平衡至室溫,各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。
3,TMB A液避光保存。
4,洗板過程非常重要,不充分的洗板易導致假陽性。
5.建議所有標準品、樣本都做雙份檢測。
6.請保持試驗過程的連續性,禁止酶標板干燥,因干燥會使酶標板上的生物成分迅速失活。
7.為避免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和試管。
8.禁止混用不同批次試劑盒內的試劑。
試驗所需自備物品:
1.酶標儀(450nm波長濾光片)
2.37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
3.自動洗板機
4.高精度移液器, EP管及一次性吸頭: 0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
5.吸水紙洗板方法:手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的PBt或TBT洗滌緩沖液 至少 0.3ml注入孔內,浸泡1-2分鐘。根據需要,重復此過程數次。自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
樣品收集:
1.血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。
2.血漿:抗凝劑推薦使用EDTA或肝素,樣品采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。
3.組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4.細胞培養上清:取細胞培養上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質及細胞碎片。取上清檢測。
5.其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測
6.樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。
7.樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(6個月內檢測),避免反復凍融。
結果判斷:
1. 以標準品的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標, 繪制標準曲線。 如有設置復孔,則應取其平均值計算。 以標準品的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,繪出標準曲線。亦可以OD值為橫坐標,標準品的濃度為縱坐標,繪出標準曲線。
2. 推薦使用專業的曲線制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據樣品OD值,由標準曲線查出相應的濃度,乘以稀釋倍數;亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
3. 若樣品OD值高于標準曲線上限,應適當稀釋后重測,計算濃度時應乘以稀釋倍數。
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